2024-03-29T09:04:01Z
https://isfj.areeo.ac.ir/?_action=export&rf=summon&issue=11286
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
بررسی تغییر فاکتورهای ایمنی هموسیت کل (Total Hemocyte Count) و پروتئین پلاسما کل (Total Protein Plasma) در میگوی پاسفید غربی آلوده به مونودون باکولوویروس(MBV)
محمد
افشارنسب
زهره
شجاعی
عقیل
دشتیان نسب
به منظور بررسی تغییرات فاکتورهای ایمنی هموسیت کل(THC) و پروتئین پلاسما کل (TPP) در میگوی پاسفید غربی (Litopenaeus vannamei) آلوده به بیماری مونودون باکولوویروس(MBV)(Monodon baculovirus) ، تعداد 360میگو جوان پاسفید غربی با میانگین وزنی 7 تا 12 گرم از استخرهای پرورشی پژوهشکده میگوی کشور تهیه و به مدت دو روز درمحل آزمایشگاه به منظور رفع استرس های محیطی وآداپته شدن بامحیط نگه داری شدند.این میگوها از لحاظ عفونت ویروسی قبل از انجام مطالعه به صورت تصادفی مورد آزمایش قرار گرفته و عدم ابتلا آنها به بیماریهای شایع از قبیل WSSV,TSV,IHHNV,MBV,HPV,NHP در مراکز تکثیر و پرورش به وسیله تست PCR مورد تائید قرار گرفت. یک گروه 60 تایی میگو به عنوان تیمار برای مواجهه با ویروس از طریق غذا با سه تکرار و گروه دیگر به عنوان کنترل با سه تکرار در نظر گرفته شد.پس از مواجهه سازی نمونه گیری جهت آزمایشات مختلف و در ساعات 0،12،24،48،96 ساعت صورت گرفت.آزمایش PCR با استفاده از کیت IQ2000 وجود ویروس را در گروه تیمار تایید نمود در حالیکه گروه کنترل عاری از آلودگی بود. تهیه همولنف از میگوها و ارزیابی THC و TPP در ساعات مورد نظر صورت گرفت و نتایج حاصل نشان داد که تفاوت معنی داری در بین گروه های کنترل و تیمار وجود داشت(P
مونودون باکولوویروس
میگوی پاسفید غربی
هموسیت کل
پروتئین پلاسمای کل
2014
12
22
1
8
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110157_cc02032b5e438e217e0d4a62db729a88.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
بررسی تأثیر غلظت های مختلف شوری بر روی میزان رشد و ترکیبات بیوشیمیایی ریزجلبک تک سلولی تتراسالمیس چوئی (Tetraselmis chuii)
الهام
اکبرپور
محمد
خلیل پذیر
عباسعلی
زنده بودی
در این مطالعه میزان رشد و ترکیبات بیوشیمیایی از قبیل کربوهیدرات، کلروفیل a و b وکاروتنوئید، ریزجلبک تک سلولی تتراسالمیس چوئی (Tetraselmis chuii) در غلظت های مختلف شوری 10، 27 و 40 قسمت در هزار، هر کدام با سه تکرار مورد مطالعه قرار گرفت، در ادامه مناسب ترین درجه شوری تعیین شد. نتایج حاصل از تیمارهای فوق حاکی از آن بود که بیشترین میزان تراکم رشد مربوط به تیمار شوری 10 قسمت در هزار با میزان 105×38/0±106×8/2 سلول در هر میلی لیتر و کمترین مقدار در تیمار شوری 40 قسمت در هزار با میزان 105×48/0±106×6/1 سلول در هر میلی لیتر می باشد (P
شوری
ترکیبات بیوشیمیایی
رشد
ریزجلبک
Tetraselmis chuii
2014
12
22
9
22
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110158_abe6d9a799150f9164241b9ccc86d162.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
سمیت تغذیهای کلوئید نانوذرات نقره در ماهی قزلآلای رنگینکمان (Oncorhynchus mykiss)
سید علی
جوهری
سهیلا
حسینی
بهمنظور مطالعه سمیت تغذیهای کلوئید نانوذرات نقره در قزلآلای رنگینکمان، ابتدا ماهیان به مدت 5 هفته با جیرههای غذایی محتوی 0، 20 و 50 میلیگرم در کیلوگرم نانوذرات نقره و سپس به مدت یک هفته با جیرههای فاقد نانوذرات تغذیه شدند. طی این مدت رشد ماهیان و نیز انباشتگی و زدایش نقره در بافت های کبد، کلیه، دستگاه گوارش و ماهیچه مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که دوز بالای نانوذرات نقره در جیره غذایی ماهیان باعث کاهش اشتها و رشد ماهیان میشود. همچنین تغذیه ماهیان با غذای محتوی نانوذرات نقره (بویژه در دوز بالاتر) باعث افزایش انباشتگی نقره در بافتهای ماهیان میشود (غلظت نقره در کبد>کلیه>دستگاه گوارش>ماهیچه). هر چند یک هفتهای در نظر گرفته شده برای زدایش نانوذرات از بافت های ماهیان کافی نبود، اما باعث تغییراتی در انباشتگی نقره در اندامهای مختلف ماهیان گردید. اثرات مشاهده شده بر اثر تغذیه ماهیان با جیره محتوی نانوذرات نقره، نشان داد که بلع نانوذرات ممکن است باعث تأثیر بر سلامت ماهیان اثر منفی بگذارد. بنابر این جلوگیری از ورود این مواد جدید به چرخه غذایی آبزیان ضروری به نظر میرسد.
قزلآلای رنگینکمان
سمیت تغذیهای
نانو سمشناسی آبزیان
نانوذرات نقره
انباشتگی
زدایش
2014
12
22
23
30
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110159_4f00cad7ce65ff9bafe0310022d61096.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
ارزش غذایی گیاه دریایی Sargassum lentifollium خلیج چابهار (دریای عمان)- قبل و بعد از مانسون
محمود
حافظیه
در این مطالعه، ترکیب بیوشیمیایی گیاه دریایی قهوه ای Sargassum lentifollium و برخی پارامترهای فیزیکی و شیمیایی آب دریای عمان منطقه ساحلی خلیج چابهار آنالیز و ارتباط بین ترکیبات غذایی این گونه و پارامترهای محیطی مورد بررسی قرار گرفت. محتوای پروتئین خام در ماده خشک این جلبک 15/1±05/8 درصد و 10/1±29/12 درصد، کربوهیدرات 03/2±11/31 و 13/2±11/25 و رطوبت 00/1±21/15 و 111±22/19 به ترتیب مربوط به قبل و بعد از مانسون با وجود اختلاف معنی داربدست آمدند حال آنکه خاکستر کل از 43/2±11/26درصد تا 40/1±11/24 درصد، چربی کل از43/0±11/2 درصد تا40/0±80/1 درصد، فیبر کل از 21/2±34/10 درصد تا33/0±84/11 درصد، و آستاگزانتین بر حسب ppm از00/1±11/104تا 81/1±20/97 به ترتیب مربوط به قبل و بعد از مانسون بدون اختلاف معنی دار بدست آمدند. در مورد فاکتور های فیزیکو شیمیایی آب دریا، نتایج نشاندهنده اختلاف معنی دار در فاکتورهای شوری، اکسیژن محلول، دمای آب، نیترات، فسفات، کلروفیل های a , c قبل و بعد از مانسون می باشد و pH، سیلیکات و کلروفیل b اختلافی را نشان ندادند. بررسی ارتباطات و همبستگی پارامترهای محیطی و ترکیب بیوشیمیایی گیاه دریایی سارگاسوم نشان داد که عوامل غیر زیستی نقش تعیین کننده ای را بر سنتز بیولوژیکی در این گیاه دریایی بازی می کنند.
Sargassum lentifollium
خلیج چابهار
ارزش غذایی
پارامترهای غیر زیستی
2014
12
22
31
40
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110160_0b6074cfadba12b4e724be85f30cfe6f.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
شنا سا یی مراحل لاروی فانوس ماهیان در آبهای ایرانی دریای عمان
مهناز
ربانی ها
فرشته
سراجی
طی نمونه برداری لارو ماهیان از تنگه هرمز تا خلیج گواتر در دو مقطع زمانی قبل و بعد از مونسون در سال 1388 با استفاده از تور نمونه گیری پلانکتون تک حلقه ای با اندازه چشمه 300 میکرون، تعداد 168 لارو فانوس ماهیان در دوره پس مانسون جمع آوری گردید که در 3 جنس شناسایی صورت گرفت که شامل: Benthosema، Diaphusو Lampadena بودند و از جنس اول دو گونه B.pterotum و fibulatum .B با توجه به نوع پوشش رنگدانه ای از یکدیگر تفکیک و شناسایی شدند.: pterotum .B با توجه به رنگدانه در نوک فک پایین و یک جفت روی پوزه از fibulatum .B جدا شده و Diaphus و Lampadena با دارا بودن تعداد زیادی رنگدانه در ناحیه شکمی عقب مخرج از جنس دیگر و Diaphus با توجه به رنگدانه در ناحیه hypural از Lampadena با توجه به فقدان این رنگدانه ها تفکیک شدند.
لارو
فانوس ماهیان
شناسایی
دریای عمان
2014
12
22
41
50
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110161_62278a8133d045f2d29772526ace1dca.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
تأثیر جیره های مختلف بر میزان هماوری، زمان تکاملی و اندازه بدن پارو پای آب شیرین Eucyclops serrulatus
امیدوار
فرهادیان
رحمان
خرامان نیا
نصرالله
محبوبی صوفیانی
عیسی
ابراهیمی درچه
تأثیر 5 جیره غذایی مختلف شامل جلبک سبز Scenedesmus quadricauda، پودر غلات گیاهی (برنج+گندم+کلزا+جو)، پودر غذای ماهی، پودر مخلوط کود (کود مرغی+کود گاوی) و مخمر نانوایی (Saccharomyces cerevisiae) بر میزان هماوری، زمان تکامل لاروی و اندازه بدن در پاروپای آب شیرین Eucyclops serrulatus مورد بررسی قرار گرفت. آزمایش در قالب یک طرح کاملا تصادفی در ظروف 50 میلی لیتری به صورت انفرادی با مادههای دارای تخم در دمای آب 26 درجه سانتی گراد به مدت 21 روز انجام شد. بیشترین هماوری در تغذیه با پودر غذای ماهی (08/1± 6/18 عدد تخم به ازاء هر ماده ، خطای استاندارد ± میانگین) و سپس به ترتیب مخمر (19/3 ± 3/17) ، مخلوط غلات گیاهی (45/2±13) ، جلبک سندسموس (41/0± 3/9) و کود مخلوط (82 /0± 6/8) بدست آمد. تفاوت معنی داری بین هماوری در تغذیه با پودر غذای ماهی، پودر گیاهی، جلبک و کود وجود داشت (05/0 P
Eucyclops serrulatus
همآوری
تکامل لاروی
اندازه بدن
جیره های جلبکی و غیر جلبکی
2014
12
22
51
62
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110162_5c1b4cfc5904a883d7161cd2b01c68c9.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
پراکنش زمانی و مکانی ماهی سفید (Rutilus frisii kutum) در سواحل ایرانی دریای خزر
حسن
فضلی
داود
کر
غلامرضا
دریانبرد
این مطالعه بمنظور تعیین پراکنش مکانی و زمانی ماهی سفید با استفاده از تور ترال کف در اعماق 100-10 متر طی سالهای 1387 الی 1389 صورت گرفت. بیشترین میزان صید در زمستان سال 1387 (2903 کیلوگرم) و صید در واحد تلاش در زمستان 1389 (08/57 کیلوگرم در نیم ساعت ترال کشی) و کمترین میزان صید و صید در واحد تلاش در فصل بهار سال 1389 بترتیب 79 کیلوگرم و 41/1 کیلوگرم در نیم ساعت ترال کشی محاسبه شد. پراکنش مکانی نشان داد که در فصل بهار و تابستان تقریبا تمام ماهیان سفید در اعماق کمتر از 20 متر متمرکز بودند. ولی در فصول سرد سال ماهی سفید تقریبا در تمام اعماق و مناطق با تراکم نسبتا زیاد گسترش داشت. در فصل پائیز بیشترین میانگین (±خطای معیار) صید در واحد تلاش در اعماق 50-20 متر 0/94 (53/78±) کیلوگرم در نیم ساعت ترال کشی برآورد شد. در فصل زمستان بیشترین میانگین صید در واحد تلاش در اعماق بیش از 50 متر در منطقه شرقی با میانگین 3/128 (64/77±) کیلوگرم در نیم ساعت ترال کشی مشاهده گردید.
ماهی سفید
پراکنش
تراکم
دریای خزر
2014
12
22
63
74
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110163_58d9ed5778937133287f897e91651298.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
تفاوتهای ژنتیکی قزلآلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) موجود در ایران و قزلآلای وارداتی از فرانسه
رقیه
محمودی
حبیب الله
گندمکار
حسین علی
عبدالحی
عباس
متین فر
سهراب
رضوانی گیل کلائی
سجاد
نظری
مهمترین گونه پرورشی آزاد ماهیان، قزلآلای رنگینکمان بومی ایران نیست و تخم چشمزده آن از کشور های مختلف وارد کشور شده و پرورش یافته است. در این مطالعه تنوع ژنتیکی دو گروه از مولدین قزل آلای پرورشی در ایران و وارداتی از فرانسه با کمک 6 جفت آغازگر ریزماهواره OMM1019 ، OMM1036، OMM1307، OmyFGT5TUF، Omy77DU و Omy207UoG مورد بررسی قرار گرفت. میانگین تعداد آلل در جمعیت ایرانی 68/6 و در فرانسوی 83/6 محاسبه شد. میانگین تعداد آلل موثر در جمعیت های ایرانی و فرانسوی به ترتیب 13/3 و 45/3 بدست آمد. میانگین هتروزایگوسیتی مورد انتظار و مشاهده شده در دو جمعیت ایرانی و فرانسوی به ترتیب 68/0 و 53/0 و نیز 71/0 و 61/0تعیین شد. با بررسی تعادل هاردی واینبرگ برای هر جایگاه مشخص شد بیشتر لوکوسها در دو گروه از نظر آماری معنی دار بوده و انحراف از تعادل را نشان می دهند. شاخص FST بر مبنای فراوانی آللی معادل 058/0 بدست آمد که وجود اختلاف معنی دار در لوکوس های مورد نظر و تلاقی غیر تصادفی درون نژادی را نشان داد. نتایج این تحقیق وجود تمایز ژنتیکی معنی داری بین ذخیره ایرانی و جمعیت وارداتی از فرانسه را نشان داد.
قزل آلای رنگین کمان
Oncorhynchus mykiss
تنوع ژنتیکی
ریزماهواره
2014
12
22
75
84
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110164_c25b06a936a1d5ffeecd306f1261807a.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
بررسی اثرات فیتو استروژنی عصاره بابونه ((Matricaria recutita بر رشد ورسیدگی اووسیت های ماهی گورامی سه خال (Trichogaster trichopterus)
طاهره
ناجی
همایون
حسین زاده صحافی
مانا
صفاری
عصاره بابونه منبع غنی از فیتو استروژن ها است، این ترکیبات خواص آنتی اکسیدانی، ضد سرطان و استروژنیک دارند. در این تحقیق اثر عصاره بابونه بر رشد و رسیدگی اووسیت ها، در ماهی گورامی ماده نابالغ بررسی گردید. بدین منظور 60 قطعه ماهی ماده نابالغ گورامی با میانگین وزن 3-2 گرم در 6 گروه تیماری مورد ارزیابی قرار گرفت. تیمار ها در قالب طرح آزمون کاملا تصادفی و با دوز های مختلف گیاه بابونه (10-20-30-50 میلی گرم به ازای هر کیلو گرم وزن ماهی) به همراه گروه شاهد (بدون تزریق) و گروه کنترل اتانولی (تزریق حلال) و با 3 تکرار، تحت آزمایش قرار گرفتند. مراحل آداپتاسیون ماهی ها به مدت 3 روز به طول انجامید. تزریق عصاره به مدت 20 روز، در10 نوبت به صورت یک روز در میان صورت پذیرفت. سه روز پس از پایان آزمایش ماهیان در هر تیمار بیهوش و پس از توزین و سنجش وزن تخمدان، مراحل پاساژ بافتی و رنگ آمیزی هماتوکسیلین–ائوزین جهت مطالعات هیستولوژیک انجام شد. در نهایت ساختار بافت شناسی تخمدان و میانگین درصد شاخص گنادی ماهیان تحت تیمار با گروه کنترل مقایسه گردید. بررسی نتایج حاصل از میانگین درصد شاخص گنادی، اختلاف معناداری بین گروه شاهد و گروه کنترل اتانولی نشان نداد (0.05 p>). بررسی ها نشان داد که میانگین درصد شاخص گنادی ،با افزایش دوز عصاره بابونه، سیر صعودی داشته است که این امر در تیمار چهارم (دوز mg/kg50) به شکل بارزتری خود را نشان داد. همچنین تفاوت بین قطر اووسیت ها با افزایش دوز عصاره بابونه مشاهده گردید ودر مقایسه با گروه شاهد اختلاف آن معنیدار بود است (0.05p
Matricaria recutita
Trichogaster trichopterus
شاخص گنادی
فیتواستروژن
2014
12
22
85
94
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110165_b2e56f30c5f87a0b80859ad3e4acda5c.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
تاثیر جایگزینی کامل روغن ماهی با روغنهای گیاهی بر روی پارامترهای رشد و پروفیل اسیدهای چرب در دوره انگشت قد ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) و بررسی این پروفیل پس از تغذیه دوباره با روغن ماهی
ابراهیم حسین
نجد گرامی
در این تحقیق تاثیر جایگزینی کامل روغنهای گیاهی (پنبه دانه، سویا و هسته انگور) با روغن ماهی و همچنین برگشت دوباره به غذای تجاری، بر روی پارامترهای رشد، بقاء و متابولیسم اسیدهای چرب در جیره غذایی بچه ماهیان آزاد دریای خزر بررسی شد. برای این منظور بچه ماهیان در 4 تیمار غذایی ( 100 درصد روغن ماهی، 100 درصد پنبه دانه، 100 درصد هسته انگور و 100 درصد سویا) به مدت 60 روز مورد بررسی قرار گرفتند. پس از طی دوره پرورش نتایج طرح نشان داد که جایگزینی روغن ماهی با روغنهای گیاهی تاثیر معنی دار بر افزایش وزن بدن، ضریب رشد ویژه و بقاء در بچه ماهیان نداشته است (P>0.05). همچنین آنالیز بافت ماهیچه پس از طی دوره پرورش نشان داد که تجمع اسیدهای چرب لینولئیک (C18:2n6) و لینولنیک (C18:3n3) در بافت بچه ماهیان در تیمارهای روغنهای گیاهی دارای بالاترین مقدار بود و استفاده از روغنهای گیاهی با توجه به افزایش میزانEPA و DHA در بافت ماهیان، مسیر غیر اشباع سازی (Desaturation) و بلند زنجیره سازی (Elongation) اسیدهای چرب سری PUFA C18 را تحریک می کند اگرچه بالاترین مقادیر EPA, DHA و آراشیدونیک اسید در تیمار روغن ماهی مشاهده شد. پس از 2 ماه پرورش با تیمارهای غذایی، نتایج برگشت به غذای تجاری نشان داد که میزان تجمع کل اسیدهای چرب اشباع، لینولئیک و لینولنیک اسید همچنان در بافت بچه ماهیان تغذیه شده با تیمارهای روغنهای گیاهی با بچه ماهیانی که از تیمار روغن ماهی استفاده کردند متفاوت است.
ماهی آزاد دریای خزر
روغنهای گیاهی
اسید چرب
متابولیسم
2014
12
22
95
108
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110166_c54e2025be10057e502a2cc59f9a663f.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
اثرات علامتگذاری بر رشد و مرگ و میر نوزادان میگوی ببری سبز (De Haan, 1844 Penaeus semisulcatus)
نصیر
نیامیمندی
غلامعباس
زرشناس
محمد خلیل
پذیر
فاضل
میرزایی
اسماعیل
آشوری
علامتگذاری میگوهای جوان میگوی ببری سبزPenaeus semisulcatus درمنطقه بندرگاه و دلوار(بوشهر) از بهمن ماه 1390 تا خرداد ماه 1391 اجرا، ووضعیت رشد و مرگ نمونه ها مورد مطالعه قرار گرفت.درایستگاه تحقیقاتی بندرگاه در3 تانک 300 لیتری حاوی میگوی ببری سبز علامتگذاری شده با رنگ قرمزالاستومر و 3 تانک میگوی بدون علامت به عنوان شاهد که هر تانک حاوی 30 نمونه بود،در مدت 98 روز انجام و اطلاعات رشد وزنی نمونه ها ثبت گردید. میزان مرگ و میر در هر دو گروه درپایان دوره نمونه-های علامتگذاری شده 52 درصد و در میگوهای بدون علامت 5/44 درصد بود. همچنین در شرکت آبزیستان، تعداد 3 تانک شاهد (بدون علامت) و 3 تانک علامتگذاری شده 300 لیتری هر کدام حاوی 30 نمونه ، پارامترهای رشد و مرگ و میر در مدت 110 روز موردبررسی قرار گرفت. میزان مرگ و میر در نمونه های شاهد و علامتگذاری شده این ایستگاه به ترتیب 63 درصد و 59 درصد بود. نتایج بدست آمده از آنالیز واریانس یک طر فه در هر دو ایستگاه، اختلاف معنی داری (05/.α = )را بین وزن نمونه های شاهد و علامتگذاری شده نشان نداد. اختلاف مرگ و میر در دو ایستگاه بندرگاه و دلوار بین نمونه های شاهد و علامتگذاری شده تا حدودی متفاوت بود و به نظر میرسد بیشتر در اثر شرایط زیست محیطی و مدیریت نگهداری میگوها میباشد، علاوه بر این علامتگذاری با روش تزریق مایع رنگی به درون بافت بدن میگوی ببری سبز تاثیری بر رشد و مرگ و میر نمونهها نداشت.
علامتگذاری
میگوی ببری سبز
رشد
مرگ و میر
بوشهر
2014
12
22
109
116
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110167_453527d5a5defb2a4c6fabba3c38252e.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
یافته علمی کوتاه: کنترل روند برگشت ازبیهوشی با گل میخک(Eugenia caryophyllata) در قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss)
ابوالحسن
راستیان نسب
سید عبدالحمید
حسینی
مصطفی
شریف روحانی
حبیب اله
گندم کار
علی
نکویی فرد
عین الله
گرجی پور
2014
12
22
117
122
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110168_3a37aaf5afbcada310f8d625dab70856.pdf
مجله علمی شیلات ایران
1026-1354
1026-1354
1393
23
1
یافته علمی کوتاه: تغییرات شبانه روزی جمعیت لارو ماهیان در آبهای ساحلی خلیج چابهار
گیلان
عطاران فریمانی
حمیدرضا
نصیری
مهناز
ربانی ها
سید علی
موسوی گل سفید
لارو ماهی
فراوانی
تنوع
خلیج چابهار
2014
12
22
123
130
https://isfj.areeo.ac.ir/article_110169_e2842ce909b69501d4809548fcdef7a2.pdf